Izravna detekcija imunofluorescencije

Dokazi o tkivnim strukturama, antitijelima i patogenima putem imunološkog označavanja popularni su, moderni i točni. Imunofluorescencija se odnosi na obilježavanje imunološkog sustava pripravljenim, fluorescentnim antitijelima koja su stvorena da svjetlucaju pod UV svjetlom.

Na Izravna detekcija imunofluorescencije supstrat se ispituje izravno svjetlosnim antitijelima, bez primarnih antitijela ili umjetnih antigena.

Što je izravno otkrivanje imunofluorescencije?

Izravna detekcija imunofluorescencije je dijagnostička metoda koja se temelji na poznavanju imunologije, imuno obojenja i imunohistokemije. Fokus ovdje je na sposobnosti antitijela da se vežu za određene točke u tkivu ili na antigene u serumu. Ta su mjesta epitopi.

U biokemijskoj dijagnostici postoje umjetna antitijela ili mimetici (pojedinačno: mimetički) koji omogućuju obilježavanje ovih veza antitijelo-antigen fluorescencijom ili radioaktivnošću. Konjugati umjetnih antitijela vežu se s jedne strane na epitope, a s druge strane imaju fluorescentni marker u slučaju imunofluorescencije. Ovo je alternativa korištenju radioaktivnih markera. Posebnost u izravnoj detekciji imunofluorescencije u usporedbi s neizravnom detekcijom jest da antitijelo koje se veže na epitop antigena u ispitivanom materijalu također predstavlja i konjugat antitijela s fluorescentnim markerom. Dodatna antitijela nisu potrebna za izravno otkrivanje.

Fluorescein, koji sjaji pod UV svjetlom, i fluoresceinski izotiocijanat (FITC) koriste se kao boje za izradu konjugata umjetnih antitijela u imunofluorescenciji. Zasad se čita pomalo komplicirano, ali izravno otkrivanje imunofluorescencije je standardna medicinska laboratorijska dijagnostička metoda za širok raspon medicinskih pitanja. Antitijela s fluorescentnom bojom su spremna za prodaju.

Funkcija, učinak i ciljevi

Izravno otkrivanje imunofluorescencije dostupno je za ispitivanje tkiva kako bi se obojile određene strukture u tkivu. Ali dostupne su i za pojedinačne ćelije. Protok citometrija igra glavnu ulogu ovdje. Konačno, tu su i imunološki testovi u čvrstoj i tekućoj fazi. Imunofluorescentna ispitivanja tkiva osobito su važna u onkologiji, tj. Medicinskom liječenju bolesti raka.

Tumorski specifični antigeni u tumorskom tkivu mogu se detektirati izravno imunofluorescencijom. Ova ispitivanja na uzorcima tkiva iz tumora često su važna kako bi se otkrilo otkud postojeće metastaze u tijelu ili kako bi se donijela odluka da li je tumor benigni ili zloćudni. Ispitivanje pojedinih stanica s otkrivanjem izravne imunofluorescencije koristi se da bi se pronašli virusni antigeni, bakterijski antigeni i drugi epitopi.

Na primjer, možete saznati jesu li stanice zaražene virusom i u kojem su stadiju infekcijskog ciklusa. Naziv FACS (= razvrstavanje stanica aktiviranim fluorescencijom) visoko je učinkovita metoda protočne citometrije u kojoj se stanice označene fluorescencijom distribuiraju u različite epruvete, ovisno o vrsti boje. Ovaj postupak važan je u imunologiji, hematologiji i zaraznim bolestima.

Imunofluorescentna ispitivanja omogućavaju izravno otkrivanje toksina iz okoliša, genetski modificiranih organizama i određenih aditiva u hrani. U ovom pokusnom okruženju uvijek postoji kruta i tekuća faza. Brojni patogeni, uključujući HIV virus koji uzrokuje AIDS, također se mogu izravno otkriti. Kod otkrivanja zaraznih i autoimunih bolesti, međutim, često je stvar otkrivanja antitijela, a ne antigena. To su obrambene molekule koje formira imunološki sustav tijela. Prema ovdje predstavljenoj definiciji, takvi dokazi nisu izravni dokazi, budući da se fluorescentna antitijela ne spajaju izravno s vlastitim antigenima tijela, već s antigenima testnog rasporeda.

Ovi antigeni u setu eksperimenta su zauzvrat povezani s vlastitim tjelesnim antitijelima. Izravna detekcija imunofluorescencije za uobičajene infekcije, primjerice HIV viruse i klamidiju, koristi se samo u posebnim testovima otkrivanja i potvrđivanja. Postoje testovi za još mnogo bolesti. U većini je slučajeva neizravno otkrivanje protutijela pogodnije za zarazne bolesti jer vlastiti imunološki sustav tijela ima genijalnu sposobnost pamćenja prethodnih infekcija. U drugim situacijama, izravno otkrivanje antigena i neizravno otkrivanje protutijela međusobno se nadopunjuju. Potonji pokazuju da je do infekcije došlo prije, dok prve daju preciznije podatke o trenutnom statusu aktivnosti patogena.

Ovdje možete pronaći svoje lijekove

Rizici, nuspojave i opasnosti

Uz izravno otkrivanje imunofluorescencije, kao i svi medicinski dokazi, postoje dva rizika: rizik od lažnog, pozitivnog rezultata i rizik od lažnog, negativnog rezultata. Lažni, pozitivni rezultati uzrokuju psihološku nelagodu i veliki stres za pacijenta.

Zbog toga se pozitivnim rezultatima dodaju dodatni postupci ispitivanja, posebno ako dijagnoza dovede do drastičnih životnih promjena. Rizik od lažnog, negativnog rezultata je da pacijent na vrijeme ne sazna o prijetnji vlastitom zdravlju, a možda čak i javnom zdravlju. Zbog toga je dobro napraviti puno istraživanja te napraviti i ponuditi veliki broj različitih imunofluorescentnih detekcija spremnih za prodaju. Zajedno s drugim izravnim i neizravnim metodama otkrivanja bolesti i patologija, to povećava točnost dijagnoze.

Izravno otkrivanje temelji se na konjugatu antitijela, koji se s jedne strane veže na epitope antigena, a s druge strane također uzrokuje fluorescenciju. Takav se proizvod stoga koristi samo u jednoj vrsti ispitnog postupka i ne koristi se za druge vrste ispitnog postupka.Ovo je važna proceduralna razlika u odnosu na neizravne dokaze, u kojima fluorescentna antitijela imaju primarna antitijela za vezanje epitopa. Konjugat antitijela je stoga pogodan za različita ispitivanja. Ova se proceduralna razlika razlikuje od medicinske razlike između neizravne detekcije antitijela i izravne detekcije antigena.