FISH test

Od FISH test je mikroskopski test kromosoma u prenatalnoj i karcinomnoj dijagnozi karcinoma dojke, raka želuca i kronične limfocitne leukemije. Test, čiji je rezultat dostupan u roku od 1 do 2 dana, može prvenstveno otkriti kromosomske nepravilnosti koje se mogu pratiti do promijenjenog skupa kromosoma u određenim kromosomima. Ispitivanje se provodi samo kao prateći ili preliminarni test za detaljnu analizu kromosoma, čiji su rezultati dostupni samo 2 do 3 tjedna nakon što su stanice uklonjene.

Što je FISH test?

FISH test (Fluorescencija in situ hibridizacija) u prenatalnoj dijagnozi omogućuje donošenje zaključaka o promijenjenom skupu kromosoma za određene kromosome. Za provođenje FISH testa potrebno je najmanje 50 nekultiviranih fetusnih stanica (amnionske stanice) koje su uzete iz amnionske tekućine (približno 2 - 3 ml). Alternativna metoda dobivanja odgovarajućih stanica je uzorkovanje korionskog vilusa, u kojem se stanice uzimaju iz područja pričvršćivanja pupčane vrpce biopsijom.

Poseban postupak omogućuje razlikovanje pojedinih lanaca kromosoma 13, 18, 21 i X i Y kromosoma fluorescentnim bojama, tako da je moguća trisomija uočljiva kroz prisustvo tri umjesto dva homološka lanca kromosoma , Kod raka želuca i dojke, FISH test može se koristiti za provjeru ima li tumor više od dvije kopije gena HER2 / neu (ljudski receptor faktora rasta), što ima posljedice za vrstu kemoterapije. U slučajevima kronične limfocitne leukemije, najčešći pomak kromosoma u pojedinim genima može se utvrditi pomoću nekoliko analiza FISH testa u uzorcima koštane srži i periferne krvi, što također utječe na terapiju.

Funkcija, učinak i ciljevi

Hromosomi u izoliranim staničnim jezgrama rađeni su da razdvoje svoju dvostruku spiralnu strukturu posebnim kemijskim tretmanom ili djelovanjem topline, a kromosomski specifične DNK sonde s odgovarajućim komplementarnim sekvencama DNA povezuju se s "njihovim" specifičnim kromosomima. DNK sonde označene su fluorescentnim bojama različitih boja, tako da se označeni kromosomi mogu razlikovati jedan od drugog pomoću posebnog softvera i računati u automatiziranom procesu.

Jesu li poznati z. B. Trisomije u kojima postoje tri umjesto dva lanca kromosoma za jedan kromosom Poznate su i takozvane monosomije u kojima postoji samo jedan lan X kromosoma i tri ili četiri homološka lanca svih kromosoma. Najvažnije kromosomske promjene koje se mogu prepoznati FISH testom u prenatalnoj dijagnozi su Ullrich Turner sindrom (monosomija X), sindrom trostrukog X (trisomija ili polisomija X), Klinefelter sindrom, u kojem u svemu ili neke somatske stanice u dječaka imaju dodatni X kromosom (XXY umjesto XY), Downov sindrom (trisomija 21), Edwardsov sindrom (trisomija 18) i Patau sindrom (trisomija 13).

Monozomija X, u kojoj djevojke imaju samo jedan X kromosom, obično je fatalna, što znači da u oko 98% slučajeva dovodi do pobačaja u prva tri mjeseca trudnoće. U slučaju da se ionako dogodi porođaj, djevojčice imaju uobičajen životni vijek, prosječne su inteligencije, ali često pate od niza malformacija unutarnjih organa i obično su sterilne. Trostruki X sindrom s kromosomskim setom XXX) utječe samo na djevojčice. Moguća je normalna trudnoća i porod.

Uglavnom visoke žene s trostrukim X kromosomom mogu normalno živjeti i obično ne pokazuju fizičke nepravilnosti, međutim teškoće u učenju nisu neuobičajene i pojavljuju se problemi s finim motoričkim sposobnostima. Klinefelterov sindrom, koji može zahvatiti samo dječake i muškarce, karakterizira dodatni X kromosom koji je prisutan u svim stanicama tijela ili samo djelomično.Tjelesne karakteristike su iznad prosječne visine s neobično dugim rukama i nogama. Klinefelter sindrom obično dovodi do smanjenog rasta testisa uz smanjeno oslobađanje testosterona.

Downov sindrom, sinonim za trisomiju 21, uglavnom je povezan s određenim fizičkim karakteristikama i kognitivnim ograničenjima. Postoje različiti oblici trisomije 21 od kojih prevladava takozvana slobodna trisomija 21 u oko 95% slučajeva. Trisomija 18 (Edwardsov sindrom) u većini slučajeva izaziva pobačaj, povezana je s različitim fizičkim značajkama, a životni vijek je samo nekoliko dana. Trisomiju 13 (Pätau sindrom) karakterizira i velik broj tjelesnih karakteristika i nepoželjni razvoj koji često dovodi do pobačaja ili mrtvorođenja. Očekivano trajanje života djece na terminu je samo nekoliko godina.

Cilj prenatalnog FISH testa je otkriti poznate kromosomske abnormalnosti u ranoj fazi kako bi se roditeljima ponudila alternativa legalnom pobačaju kojim bi se dijete moglo roditi na vrijeme. Kod karcinoma dojke i jetre karcinom se može provjeriti na povećani broj HER2 / neu gena pomoću FISH testa. U pozitivnom slučaju dolazi do pojačanog stvaranja receptora faktora rasta koji reagiraju na određene kemoterapije. FISH testovi su također dostupni za otkrivanje specifičnih genetskih abnormalnosti kronične limfocitne leukemije (CLL) koje poboljšavaju sastav učinkovitih sredstava za kemoterapiju.

Rizici, nuspojave i opasnosti

Sam FISH test nije povezan s bilo kakvim rizicima ili opasnostima. Samo ekstrakcija stanica koje se pretražuju biopsijom ili uzorkovanjem amnionske tekućine (amniocenteza) povezane su s malim rizikom infekcije zbog svog invazivnog karaktera. Posebnost je da FISH test može otkriti neke specifične kromosomske nedostatke, ali ne može se garantirati da nema kromosomskih aberacija u slučaju negativnog rezultata, jer se FISH testom ne mogu otkriti sve anomalije. U slučaju pozitivnog rezultata ispitivanja, trebaju se slijediti daljnji dijagnostički postupci kako bi se potvrdio rezultat ili odbacio kao neistinit.